Типирование вируса гепатита С (HCV)

Срок исполнения, рабочих дней: 7

ДНК-типирование, которое еще называют генетическим – это тщательный анализ генома и ДНК с целью точного определения тех особенностей генотипа, которые имеет отдельно взятый организм. При проведении ДНК-типирования организма определяется, какие особенности имеет первичная структура его ДНК в неких конкретных генетических локусах.

Для того чтобы произвести типирование, очень важную роль играют следующие характеристики дезоксирибонуклеиновой кислоты, определяющие ее информационную функцию: 1) все живые организмы (за исключением тех, которые получены методом клонирования, или однояйцовых близнецов) имеют свои, строго индивидуальные особенности, заключающиеся в последовательности нуклеотидов (то есть составных частей ДНК); 2) каждый отдельно взятый организм (особь) имеет абсолютно одинаковую ДНК клеток тела (так называемых соматических клеток).

Идентификация ДНК организма может производиться с использованием абсолютно любого биологического материала, например, кожи, семенной жидкости, крови, слюны, корней волос, а также семена и листья растений. При этом практически единственным условием является то, чтобы сама ДНК сохранилась в этом материале не разрушенной.

Саму процедуру ДНК-типирования можно разделить на несколько основных этапов. Самым первым из них является экстракция, при которой из имеющегося в наличии биологического материала происходит выделение дезоксирибонуклеиновой кислоты. После этого ДНК следует «расчленить» на определенное количество фрагментов, имеющих разную длину, используя специальные ферменты. Далее следует связывание (гибридизация) этих фрагментов дезоксирибонуклеиновой кислоты с радиоактивными зондами, представляющими собой цепочки сходной по структуре ДНК. Затем следует этап, на котором пространственное распределение всех фрагментов фиксируется на рентгеновской пленке с использованием метода радиоавтографии. Для этого все фрагменты той ДНК, которая исследуются, засвечивают на рентгеновскую пленку. Благодаря тому, что они «помечены» и связаны радиоактивными зондами, то на пленке эти элементы ДНК имеют вид черных полосок, которые располагаются друг под другом.